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N端测序服务-Edman降解法

务简

Edman降解测序是通过化学反应依次切下蛋白质N端的每一个氨基酸,再使用HPLC液相色谱分别鉴定氨基酸的ID,得到的氨基酸信息排序结果即为蛋白质N端的序列。Edman降解是蛋白质测序中一个非常重要的反应步骤,因为通过该反应可以对蛋白质有序的氨基酸组成进行分析。

 

内容

Edman测序法可以直接分析氨基酸信息,不需要借助任何蛋白质数据库,因此,可以对全新的没有数据库信息的蛋白质进行N端序列分析。百欧泰生物具有丰富的测序经验,可以根据您的需求为您提供合适的方案。

 

实验原理

第一步,Edman降解:通过PITC(苯异硫氰酸酯)这种有机试剂和蛋白或多肽N末端的α-氨基反应,使得N端的第一个氨基酸从序列上断裂得到游离的PITC衍生氨基酸,同时暴露出序列中第二个氨基酸残基的α-氨基。

 

第二步,测序:断裂下来的PITC衍生氨基酸通过HPLC分离后根据保留时间来判断氨基酸的种类。

这一系列过程可以采用自动化测序仪来完成。

N端测序.png

Edman降解过程

N端测序1.png


测序样品纯度达到95%以上,一般出现一个Glu的峰,其他的DTTDMPTUDPTU为试剂峰


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实验服务流程

双方沟通一致后确定实验方案,确定要求-签订合同付款-开始实验-成果交付

 

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