圆二色谱检测服务
服务编号:BIOYJ002
服务简介
圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer,CD)是一种用于测量光学活性物质对左旋和右旋圆偏振光吸收差异的分析仪器,专门用于研究具有手性(不对称性)的生物分子和有机化合物。当平面偏振光通过手性介质时,左旋和右旋圆偏振光的吸收率不同,这种差异即为圆二色性。该仪器通过检测样品在圆偏振光下的Cotton效应,获得药物结构中发色团周围环境的立体化学信息。圆二色谱仪广泛应用于有机化学、分析化学、无机化学、生物化学、药物化学、食品化学、高分子材料、纳米材料等领域。
北京百欧泰生物科技有限公司提供高灵敏度、高分辨率的圆二色谱检测服务,帮助您深入解析蛋白质、核酸、多肽、糖类以及手性药物分子的二级结构、高级结构、折叠/去折叠过程、构象稳定性及分子间相互作用。
圆二色谱检测流程


核心组件
圆二色光谱仪的核心组件包括光源、分光系统、样品室、检测器和数据处理系统,这些组件共同确保了仪器的灵敏度和测量精度。
a. 光源:通常采用150W气冷氙灯或可调谐激光器,提供宽波长范围(170-900 nm)的圆偏振光。在紫外区域(160-250 nm),氙灯具有高光通量,但由于臭氧的生成和镜面氧化,需要通过氮气吹扫进行保护。
b. 分光系统:使用双偏振式棱镜或光栅将输入光分解为左旋(LCP)和右旋(RCP)圆偏振光,其波长分辨率可达0.1 nm。这种设计有效消除了普通光干扰,确保测量的精确性。
c. 样品室:支持溶液或固体样品分析,配备温控模块(可选-196℃至400℃)。样品室的材料通常选择石英或玻璃,以避免对样品产生干扰。
d. 检测器:采用光电倍增管(PMT)或CCD阵列,这些检测器能够检测光强差异并将其转换为电信号。检测器的灵敏度很高,可以记录到微弱的吸收变化。
e. 数据处理系统:内置算法用于计算摩尔椭圆率([θ])和各向异性因子(g),同时支持3D结构模拟。通过这些分析,可以深入理解样品的手性结构。
核心应用领域
1.蛋白质结构分析:精确测定蛋白质的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲等二级结构含量。
2.核酸结构研究:分析DNA和RNA的构象变化及稳定性。
3.多肽与手性药物:研究多肽的构象特征,以及手性药物与生物大分子的相互作用。
4.分子相互作用:检测蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸、蛋白质-小分子配体(如药物)之间的结合,确定结合常数和热力学参数。
5.折叠与去折叠:实时监测温度、pH值、变性剂(如尿素、盐酸胍)诱导的蛋白质折叠/去折叠过程,评估构象稳定性(Tm值)。
6.抗体与疫苗研发:用于抗体药物的结构确证、批次间一致性评价及稳定性研究。
注意事项
1. 样品准备
测试样品必须保持高纯度,不含光吸收杂质,且溶剂在测定波长范围内无吸收干扰。在蛋白质测量中,常选用透明性优异的磷酸盐作为缓冲体系。此外,样品浓度需适中,浓度过高可能导致信号饱和,而浓度过低则可能无法检测信号。具体浓度应根据样品性质及测定条件优化选择。
2. 仪器操作
仪器应在稳定的实验环境中操作,避免因振动或移动导致测量误差。在测量过程中,需密切观察仪器运行状况,确保其正常工作。使用完毕后,按规范步骤关闭仪器并清洁设备,以防止样品残留影响下次使用。
3. 溶剂选择
选择溶剂时,需考虑其截止波长。测试范围的最小波长不能低于溶剂的截止波长。此外,缓冲液的浓度过高可能在190-200 nm出现吸收,影响实验结果。
4. 安全措施
为确保操作安全,需佩戴实验室服、手套、护目镜等个人防护装备。在操作过程中,应避免触摸光学元件,以防止仪器损坏。
样品要求
样品状态:通常为溶液状态(缓冲液需无强紫外吸收,如避免使用Tris缓冲液在远紫外区检测)。
样品浓度:蛋白质通常为0.5-1.0 mg/mL(视分子量和消光系数而定)。
样品体积:至少500 uL。
缓冲液信息:请提供详细的缓冲液成分、pH值和离子强度。
其他:粉末、薄膜或特殊样品请提前咨询(固体样品一般需要0.5-1.0 mg)。
注:
波长范围: 163-1500 nm;
支持固体样品测试,蛋白/多肽、小分子、核酸样品液体溶液测试;
支持变温测试,温度范围:5℃-95 ℃;
支持ECD测试。
服务优势
1 先进仪器平台:配备国际领先的圆二色谱仪(JASCO J-1500),具备高灵敏度、低杂散光和宽波长范围(远紫外-可见光区);
2 专业团队支持:拥有经验丰富的测试团队,提供从实验设计、样品制备指导到数据分析的全方位技术支持;
3 定制化方案:根据您的样品类型(溶液、膜、晶体)和具体研究目标,量身定制最合适的检测方案。
4 快速响应:标准样品通常可在1-3个工作日内完成检测并交付数据。
服务流程
双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付
检测结果示例

测试参数:圆二色谱仪型号:JASCO J-1500
测试波长:163~1500 nm
速度:200 nm/min
带宽:0.5 nm
比色管光程:1 mm

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