蛋白表达服务-北京百欧泰生物科技有限公司

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杆状病毒-昆虫蛋白表达服务

服务简介

昆虫是一类蕴藏着大量高品质动物蛋白的生物资源，具有巨大的开发和应用潜力，昆虫细胞可表达多种外源基因，包括真菌，植物，细菌，病毒等基因。对一些重大害虫采取蛋白质资源化管理研究和利用高新技术来生产高价值的昆虫蛋白将是 2 1世纪昆虫蛋白质资源开发的重要研究领域。杆状病毒是一类以昆虫细胞为天然宿主的双链DNA病毒，具有高度的种属特异性，不感染脊椎动物，对人、畜无害。

昆虫表达系统的原理是通过将转移载体中的表达组件转座到大肠杆菌中增殖的杆状病毒穿梭载体上，提取穿梭质粒DNA转染昆虫细胞后，得到的子代病毒即为重组病毒。将病毒上清侵染昆虫细胞，获得表达的重组蛋白。其蛋白表达量可达昆虫细胞总蛋白的50%，并可表达非常大的外源性基因（约200KD）。
昆虫杆状病毒表达载体系统具有安全性好,重组蛋白表达量高，能同时表达多个基因，重组蛋白翻译后加工完整等特点，因而得到了广泛的应用。随着重组杆状病毒构建技术的不断发展，昆虫杆状病毒表达载体系统的操作在逐渐简化，重组杆状病毒获得的效率也在不断提高。随着分子生物学技术的发展，对杆状病毒载体的研究与改造也会更加深入，未来昆虫杆状病毒表达载体系统的应用将更为广泛。

百欧泰杆状病毒-昆虫蛋白表达服务，不断改进优化表达体系，并有丰富的细胞选择经验（Sf9，Sf21，Hi-5），可为选择百欧泰客户提供满意的蛋白表达纯化服务。

服务步骤

1 基因合成及密码子优化（可选）

2 载体构建

根据客户需求，选择表达体系

包括表达载体，表达细胞（Sf9，Sf21，Hi-5），转染试剂

亚克隆至质粒载体
质粒测序
大量质粒制备

周期：1-2周

3 病毒包装及扩增

病毒包装

杆状病毒与辅助质粒共转化，完成重组杆状病毒质粒的构建
病毒扩增

重组病毒质粒转染昆虫细胞，收集细胞上清为P1代重组杆状病毒（低浓度），传代培养上清病毒液为P2代重组杆状病毒（高浓度）

周期：2-3周

4 表达及纯化

病毒侵染细胞

优化表达及纯化条件

重组蛋白鉴定

SDS-PAGE和Western blot检测纯化蛋白

周期：2-3周

5 大量表达及纯化（可选）

周期：2-3周

6 交付结果

测序报告

纯化蛋白

SDS-PAGE/WB报告

COA

服务优势

杆状病毒-昆虫蛋白表达体系是目前四大重组蛋白表达手段之一，其主要优势在于：

l 表达水平高

l 高效表达胞内和胞外蛋白

l 多种昆虫动物细胞Sf9，Sf21，Hi-5可供选择

l 大规模蛋白表达生产

百欧泰生物酵母蛋白表达体系具有丰富的宿主细胞和载体选择经验，可提供多种服务优势：

l 体系成熟：具备完善的酵母表达平台，成熟的蛋白表达体系；

l 服务为主：可根据蛋白特性与客户需求综合分析，设计不同的实验方案，并对客户整体表达体系进行摸索与优化。

l 自我完善：时刻完善蛋白诱导表达的操作步骤，为客户提供高质量蛋白产品。

l 一站式服务：基因设计及优化，载体构建，病毒包装，表达纯化，数据分析及报告整理

服务流程

双方沟通一致后确定实验方案，确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付

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