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基因敲除

服务编号:BIOFW061

服务简介

基因组编辑技术是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。这种技术的原理是构建一个人工内切酶,在预定的基因组位置切断DNA,切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。

CRISPR是一种来源于细菌免疫系统的基因编辑技术,能识别靶细胞DNA片段中靶点的核苷酸序列,利用核酸内切酶蛋白对DNA靶点序列进行切割,产生双链DNA断裂,断裂将在体内被细胞修复机制修复,其中,非同源末端连接NHEJ这种修复将产生短的核酸插入或删除,其带来的基因移码突变,将导致提前出现终止密码子,从而完成对靶细胞DNA目的基因片段的敲除。Cas9/gRNA基因鼓除体系通过一小段gRNA识别特异DNA序列,对识别位点附近的DNA切割从而实现基因的定点敲除或敲入。由于特异基因识别由一小段RNAgRNA完成,而系统中的蛋白组成部分保持不变,因此可以非常方便的采用不同的人工合成或表达的gRNACas9蛋白配合,实现对不同基因的敲除。

百欧泰建立了一套成熟稳定的基因干扰表达的实验体系,可针对多种不同细胞(包括难转染细胞)为您提供基因敲除细胞株的构建服务。具备成熟的细胞实验服务平台,服务内容丰富详细。同时还可为客户提供包括过表达、沉默稳转细胞系构建等多种技术服务。

 

服务步骤

1  稳转细胞株筛选

2  载体构建

3  病毒包装

4  细胞转染

5  稳定转染细胞株筛选

6  交付(可商榷)

实验报告

构建病毒载体

目的基因表达检测报告

基因敲除细胞株

 

细胞选择

1  不能有支原体污染

2  选择有成功案例的细胞株

3  细胞容易增殖、克隆形成率高、没有多基因的问题、染色体不要突变太严重

4  肿瘤细胞系

应用范围

1  研究基因的功能及表达调控机制

2  寻找合适药物作用靶点

 

服务优势

百欧泰团队具有丰富的细胞系构建经验,可提供多种服务优势:

成功率与快速交付速度

服务为主:价格合理,可根据客户需求综合分析,为客户提供满意的结果

专业的技术支持,保障强力、周到及时的售前售后服务支持,随时为您解答出现的任何问题

完整的上下游服务:具备完善的细胞、抗体、蛋白等服务平台一站式技术服务,节约客户宝贵时间和经费

多种不同启动子和标签的慢病毒表达载体可供选择;

细胞来源清晰,质量有保证:无细菌、真菌和支原体污染

 

服务流程

双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付

 

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